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产品内容:
       1.Taq DNA聚合酶
       2. Pfu-plus DNA聚合酶
       3. M-MLV 逆转录酶
       4.SYBR GreenⅠ2×Master Mix

 
PCR简介:
       聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。
       PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95℃高温时变性会变成单链,低温(经常是60℃左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72℃左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。 基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。

       PCR反应五要素:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。

 
产品说明:
       1.Taq DNA聚合酶
        Taq DNA聚合酶是来源于嗜热水生菌Thermus aquatics yT-1菌株的热稳定蛋白。Taq DNA聚合酶具有5'-3'聚合酶活性,无3'-5'外切酶活性,可用于简单的PCR扩增反应。扩增产物具有3'-dA。
       2. Pfu-plus DNA聚合酶
       Pfu-plus DNA聚合酶是极端嗜热性细菌Pyrococcus furiosus来源的高度热稳定Pfu DNA聚合酶二代产品,该酶具有5'-3'聚合酶活性和3'-5'外切酶活性。Pfu-plus DNA聚合酶在Pfu DNA聚合酶的基础上添加了dUTPase,dUTPase可去除PCR抑制剂,因此Pfu-plus DNA聚合酶是一种长链高保真聚合酶。主要用于大片段DNA的扩增。PCR扩增产物为平滑末端。
       3. M-MLV 逆转录酶
       莫洛尼氏鼠白血病毒逆转录酶(M-MLV RT)能以单链RNA或DNA为模板,在引物的引发下合成与模板互补的DNA链。本逆转录酶是通过基因重组技术克隆表达的M-MLV逆转录酶突变型,RNase H活性缺失。在第一链cDNA合成过程中具有更强的延伸能力和稳定性。
       4.SYBR GreenⅠ2×Master Mix
       采用SYBR GreenⅠ嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。SYBR GreenⅠ2×Master Mix是2×浓缩的Real Time PCR扩增的预混和溶液,包含DNA聚合酶、SYBR GreenⅠ、dNTPs、缓冲液等。进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单,缩短操作时间,降低污染。

 


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